微生物 水體中大腸菌群的檢測
更新時間：2013-05-26 瀏覽次數(shù)：1794
蛋白胨 10g，牛肉膏 3g，乳糖5g，氯化鈉 5g，1.6％溴甲酚紫乙醇液 1.0mL，蒸餾水 1000mL，pH 7.2~7.4。
按上述普通乳糖蛋白胨培養(yǎng)液濃縮三倍配制，分裝于有杜漢氏小管的試管中，每管5mL。
蛋白胨 10g， 乳糖 10g，K2HPO4 3.5g，瓊脂 15～20g，蒸餾水1000mL，無水亞硫酸鈉 5g，5％的堿性品紅乙醇溶液 20mL，pH 7.2~7.4。
4、伊紅美藍培養(yǎng)基（EMB培養(yǎng)基）（供發(fā)酵法平板分離用，3和4可任選一種）
蛋白胨10g，乳糖10g，K2HPO4 2.0g，瓊脂20g，蒸餾水1000mL，2％伊紅（曙紅）水溶液 20mL，5％美藍（亞甲藍）水溶液13mL，pH 7.2~7.4。
（二）滅菌移液管、滅菌稀釋水、試管、杜漢氏小管、革蘭氏染色液、滅菌培養(yǎng)皿。
1、自來水取樣：應在水打開放水5min ，再用無菌容器接取水樣，待分析。如水樣內(nèi)含有余氯，則采樣瓶滅菌后按每500mL水樣加3％Na2S2O3.5H2O溶液1mL。
2、江、河、湖、池自然水體取樣：可用采樣器，采樣瓶應先滅菌。采樣后，瓶內(nèi)應留有空隙。如果與其他化驗項目聯(lián)合取樣，細菌學分析水樣應采在其他樣品之前。
若實驗所測定的15支管中均為陽性反應，說明濃水樣污染嚴重，可將樣品進一步稀釋后，再按上述方法接種、培養(yǎng)和觀察。
（3）先對試管輕擊并使之傾斜，以免接種針挑取到任何膜狀物或浮渣；
（4）劃線時要用針尖的彎曲部分接觸瓊脂培養(yǎng)基平面．以免刮傷或戳破培養(yǎng)基。劃線后培養(yǎng)皿倒置，于37℃培養(yǎng)18～24h。
經(jīng)上述經(jīng)染色為革蘭氏陰性的典型菌落，用接種環(huán)刮取部分接種于盛有乳糖培養(yǎng)基的試管中，在37℃培養(yǎng)24h，陽性反應者即確認為大腸菌群細菌。
如果初發(fā)酵接種水樣量為10mL、1mL、0.1mL，可直接查表求出原水樣100mL中大腸菌群指數(shù)（MPN）。如果接種水樣量低于上述水樣量，則經(jīng)下面的換算式計算。
目前我國系以1L水樣中的菌數(shù)為報告值，即為MPN×10。
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